包埋法属于什么生物技术
- 教育综合
- 2023-03-18 07:56:57
包埋法指的是什么?
包埋法是制备固定化酶或固定化细胞的一种方法,是将酶或细胞包埋在能固化的载体中。
如将酶包裹在聚丙烯酰胺凝胶等高分子凝胶中,或包裹在硝酸纤维素等半透性高分子膜中,前者包埋成格子型,后者包埋成微胶囊型。包埋法常用于微生物、动物和植物细胞的固定化。
分类
微生物包埋法
包埋法的原理是将微生物细胞截流在水不溶性的凝胶聚合物孔隙的网络空间中。通过聚合作用或者离子网络形成,或通过沉淀作用,或改变溶剂、温度、pH值使细胞截流。
凝胶聚合物的网络可以阻止细胞的泄漏,同时能让基质渗入和产物扩散出来。包埋法操作简单,对细胞活性影响较小,制作的固定化细胞球的强度高,目前工业应用上以凝胶包埋法固定细胞最为广泛。
共价结合法
共价结合法是细胞表面上功能团和固相支持物表面的反应基团之间形成化学共价键连接,成为固定化细胞,该法的连接键很牢固。
共价结合法可分为两种:一种是先将载体有关基团活化,然后与酶有关基团发生共价偶联反应。另一种是先在载体上共价连接一个双功能试剂,然后将酶共价偶联到双功能试剂上去。
交联法
交联法是使用双功能或多功能试剂,直接与细胞表面的反应基团如氨基、羧基等进行交联,形成共价键来固定细胞,其结合力是共价键。此法制备的细胞与载体结合紧密,但制备麻烦,活力损失较大,常用的交联剂有戊二醛、甲苯二异氰酸酯、双偶氮联苯等。
吸附法
又称载体结合法,是通过物理吸附、化学或者离子键的结合,将微生物固定于非水溶性载体。这种方法操作简单,对微生物活力影响小,但所结合的微生物数量有限,反应稳定性和反复使用性差。吸附法可分为物理吸附法和离子吸附法。
细胞生物学实验中常用来固定细胞或细胞器的方法有哪些
细胞固定化方法有:Adsorption(吸附);covalent bonding(共价结合);Cross linking(交联);Entrapment(包埋)、Encapsulation(微胶囊) 。下面对这几种做具体介绍。 一、吸附法 1,原理 利用载体和细胞表面所带电荷的静电引力(van der Walls forces),使细胞吸附于载体上。吸附法可分为物理吸附和离子吸附两种。该法操作简单,固定化过程对细胞活性影响小。 2,载体的材料 采用吸附法固定细胞,所用的载体主要有:硅藻土、木屑、多孔玻璃、活性炭、 多孔陶瓷、离子交换树脂和等。塑料 3,影响吸附固定化的因素 (1)Z-电位 (2)微生物包埋法的介绍
包埋法的原理是将微生物细胞截流在水不溶性的凝胶聚合物孔隙的网络空间中。通过聚合作用或者离子网络形成,或通过沉淀作用,或改变溶剂、温度、pH值使细胞截流。凝胶聚合物的网络可以阻止细胞的泄漏,同时能让基质渗入和产物扩散出来。包埋法操作简单,对细胞活性影响较小,制作的固定化细胞球的强度高,目前工业应用上以凝胶包埋法固定细胞最为广泛。