培养的骨髓瘤细胞每3～6个月应用8一AG筛选一次，以除去HGPRT回复突变的细胞，浓度多少

什么是骨髓瘤细胞8-ag培养基

8－AG（即8－氮鸟嘌呤）是一种碱性细胞杀伤因子。细胞DNA的合成主要是两个途径，一个是主要途径，一个是补救途径，而HGPRT酶（即次黄嘌呤－鸟嘌呤核糖转移酶）是补救途径嘌呤的主要合成酶，正常情况下，细胞可以同时通过这两种途径来合成DNA。而8－AG也是一种嘌呤，自然也可以被认为是一种合成DNA的原料，但由于它是有毒的，它的存在会杀死细胞。而HGPRT酶缺陷的骨髓瘤细胞不能通过补救途径合成DNA，所以就可以存活。因而经8－AG筛选后的sp2/0细胞都是HGPRT酶缺陷株。

单克隆抗体制备的基本原理与过程？有什么意义

原理： B淋巴细胞在抗原的刺激下，能够分化、增殖形成具有针对这种抗原分泌特异性抗体的能力。B细胞的这种能力和量是有限的，不可能持续分化增殖下去，因此产生免疫球蛋白的能力也是极其微小的。将这种B细胞与非分泌型的骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞，再进一步克隆化，这种克隆化的杂交瘤细胞是既具有瘤的无限生长的能力，又具有产生特异性抗体的B淋巴细胞的能力，将这种克隆化的杂交瘤细胞进行培养或注入小鼠体内即可获得大量的高效价、单一的特异性抗体。这种技术即称为单克隆抗体技术。 过程 1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也

人体内最主要的抗体是？

抗体 科技名词定义 中文名称：抗体 英文名称：antibody;Ab 定义1：能与相应抗原(表位)特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 应用学科：免疫学（一级学科）；免疫系统（二级学科）；免疫分子（三级学科） 定义2：在人和动物体内，由于抗原或半抗原入侵刺激机体而在细胞中产生的免疫球蛋白。能可逆、非共价、特异地与相应抗原结合，形成抗原-抗体复合体。 应用学科：生物化学与分子生物学（一级学科）；总论（二级学科） 定义3：机体内B细胞在抗原刺激下所产生的具特异性免疫功能的球蛋白。 应用学科：水产学（一级学科）；水产生物病害及防治（二级学科） 定义4：具有抗原结合部位，能与抗原分子上相应表位发生特异性

单克隆抗体的制备过程

过程 1）免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系 Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备，也可采用脾内直接免疫法。 2）骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前，骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选，防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性（恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活）。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养，融合前24h换液一次，使骨髓瘤细胞处于对数生长期。 3）细胞融合的关键: 1技术上的误差常常导致融合的失败。例如，供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。 2融合试验最大的失败原因是污染，融合成功的关键

关于T细胞和瘤细胞的问题

任何一种病原微生物都具有多种抗原决定簇，因 此，在机体内诱发出来的抗体也必然是多种抗体的混 合物，称为多克隆抗体, 这种抗体制剂在医疗中常常 发生非特异性交叉反应而出现假阳性结果。 根据Burnet的“克隆选择”学说，每个淋巴B细胞 克隆只能产生一种能识别特异性抗原决定簇的抗体， 这就是单克隆抗体 (monoclonal antibody, McAb)。 单克隆抗体是将抗体产生细胞与具有无限 增殖能力的骨髓瘤细胞相融合，通过有限稀释 法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细 胞系而产生的。 制备特定抗原的单克隆抗体，首先要制备用于免 疫的适当抗原，再用抗原进行动物免疫。 有的抗原可以用化学合成