农杆菌通过什么增殖

农杆菌转化法中,侵入伤口的农杆菌为什么不会扩增,转移到周围细胞中?

农杆菌转化法实际上农杆菌会进行增殖的。因此对于叶盘或愈伤转化法来说,具有一个脱菌过程,即在共培养之后的选择培养基中附加250~500mg/L 的羧苄青霉素或头孢霉素,用来抑制农杆菌增殖,从而达到在后续实验中消除转化植物组织中农杆菌的作用。对于花序浸液法转化来说,由于种子会经历干燥过程,这本身就是一个脱菌过程了,

农杆菌转化法为什么通过大肠杆菌扩增基因？

大肠杆菌在生物技术中的应用：大肠杆菌作为外源基因表达的宿主，遗传背景清楚，技术操作简单，培养条件简单，大规模发酵经济，倍受遗传工程专家的重视。目前大肠杆菌是应用最广泛，最成功的表达体系，常做高效表达的首选体系。

农杆菌转化法的原理是什么？

农杆菌转化法的原理是构建双元表达载体系统，由两种质粒组成，一种是位于大肠杆菌中的穿梭质粒，另一种是位于农杆菌中的辅助性质粒。

将重组质粒电转化到农杆菌感受态细胞中后，用含有重组质粒的农杆菌去侵染植物根部切口，通过辅助性质粒的Vir区表达蛋白与重组质粒T-DNA区的反式作用激活T-DNA的转移，从而将目的片段整合到植物细胞基因组中。随着愈伤组织的形成，使得新生细胞均含有该目的片段的基因。

扩展资料：

农杆菌Ti质粒转化系统与其他基因转化体系相比，具有许多突出的优点：

1、该转化体系是模仿或称之为利用天然的转化载体系统，成功率高，效果好；

2、农杆菌Ti质粒转化系统的机理研究得最清楚，方法最成熟，应用也最广泛；

3、农杆菌Ti质粒转化系统转化的外源基因以单拷贝为多数，遗传稳定性好，并且多数符合孟德尔遗传规律，因此转基因植株能较好地为育种提供了中间选育材料；

4、农杆菌Ti质粒转化系统操作比较容易，需要的仪器设备简单，易于推广。

参考资料来源：百度百科-农杆菌转化法

老师 农杆菌转化法中农杆菌的作用是什么

农杆菌细胞中分别含有Ti质粒，其上有一段T-DNA，农杆菌通过侵染植物伤口进入细胞后，可将T-DNA插入到植物基因组中，并且可以通过减数分裂稳定的遗传给后代。 中学阶段理解到上述层次即可。

农杆菌转化法的步骤

1、农杆菌培养至适当浓度。

2、受体材料消毒处理并切成适当大小组织块。

3、组织块浸泡于菌液中适当的时间。

4、浸泡过的组织块放于共培养基上培养。

5、组织块转移到筛选培养基上培养，选出阳性幼苗。检测方法根据实验目的不同而不同。可以用PCR扩增目的片段；如果有报告基因GUS、GFP等也可以进行染色或荧光观察。

原理：

选择一种特制的空质粒载体（如PBI121质粒载体），其上要求含有T-DNA边界序列（此处可参见词条双元表达载体系统），在序列之间含有复制原点、抗性基因、GUS报告基因、Hind Ⅲ和BamH I 等酶切位点（以上这些构成了一个T-DNA区）。先通过双酶切反应酶切空质粒载体和目的基因，再通过酶连反应连接空质粒载体和目的基因，从而构建成完整的重组质粒。

以上内容参考：百度百科-农杆菌转化法