微生物遗传育种中常见突变株筛选方法,如何应用
- 教育综合
- 2023-04-03 07:56:57
比较微生物,动植物基因突变的筛选与鉴定方法主要区别是什么
1.功能互补法:使突变株表达,与空白相对比 2.核酸杂交法:使用突变株基因单链与原基因杂交,能完全配就未能成功 3.定位克隆 4.差别杂交分离目地基因怎样筛选营养缺陷型菌株
在筛选营养缺陷型突变株的工作中,常用三种培养基:
一是基本培养基,它是仅能满足微生物野生型菌株生长要求的培养基。第二种是完全培养基,它是能满足某微生物所有营养缺陷型菌株营养要求的天然或半合成培养基。第三种是补充培养基,凡是只能满足某种营养缺陷型生长需要的合成培养基,就称为补充培养基。
1、用于诱发营养缺陷型的诱变剂有亚硝基胍,紫外线,亚硝酸等,其中亚硝基胍的诱发突变率极高,一般可达10%以上,另外,随着诱变剂量的提高突变频率也增加。
2、在诱变之后存活的菌体中,存活的营养缺陷型菌株的数量很少,而野生型细胞却大量存在,所以常采用抗生素法和菌丝过滤法来筛选营养缺陷型菌株。
3、经过第二步,野生型的细胞和营养缺陷型细胞数量比例发生很大变化,但是终究还是混合体,要设法把缺陷型菌株从群体分离检出,可用点植对照法,影印法,夹层法,限量补充培养法来分离。
4、缺陷型菌株的鉴定,实际是测定营养缺陷型菌株所需的生长因子种类。鉴定的方法可分为两大类:一种方法是在一个平皿中加入一种营养物质以测定多株缺陷型菌株(10-50)对该生长因子的需求情况。
第二种方法是在同一个平皿上测定一种缺陷型菌株对许多生长因子的需求情况,成为生长谱法。
扩展资料:
营养缺陷型菌株广泛应用于核苷酸及氨基酸等产品的生产。
1、阻断代谢途径,积累中间代谢产物。
2、阻断分支代谢,改变代谢方向,积累另一终端代谢产物。
3、解除反馈抑制,积累代谢产物。
4、利用渗漏缺陷型进行代谢调控育种。
参考资料来源:百度百科-营养缺陷型菌株