细菌总RNA纯度A260/230范围是多少

RNA质量中260:230是什么意思

A260:A230是分光光度计测量RNA溶液的浓度出现的数值，表示样品的纯度。

1、A260nm：核酸的吸收峰测，测RNA，DNA等的浓度用的。260nm是核酸分子吸收峰的波长，是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。

2、A230nm：测定碳源物质，如酚，糖类等浓度用的，是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估。A230表示样品在230nm的波长处出现了吸收。在A230处出现吸收峰的原因是样品中存在一些污染物，如碳水化合物，多肽，苯酚等。

3、A260:A230可以表征样品的纯度，A260:A230的比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

扩展资料

一、RNA质量检验。

RNA样品的品质检测一般分为总量，纯度与完整性三大项。

1、总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。

2、纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染比例。

3、完整性：以AgilentBioanalyzer进行毛细管电泳(capillaryelectrophoresis)，并以软件的RIN(RNAIntegrityNumber)分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。

二、RNA纯度。

RNA在纯化过程中容易受到DNA、蛋白质及有机溶剂的影响，这些残存物将会影响以后的操作。

光谱分析(NANODROP)利用物质对不同波长光的吸收度的不同，可以鉴别出溶液纯度及浓度。

RNA溶液的A260/A280的比值是一种RNA纯度检测方法，比值范围一般为1.8-2.1。各项实验对RNA纯度要求不一，比如即使比值超出这个范围，RNA样品也一样可以用于一些普通实验中，如Northern杂交、RT-PCR、荧光定量PCR和RNA酶保护等实验。

参考资料来源：

百度百科-分光光度计-核酸的定量

RNA质量中260:230是什么意思？

RNA质量中260:230：分光光度计测量RNA溶液的浓度。

260nm是核酸分子吸收峰的波长，而230nm的波长处如果出现吸收，则最有可能由苯酚等化学基团引起。

1、A260nm：是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。

2、A230nm：是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估。

RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0表明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。

扩展资料

RNA样品的质量检验一般分为总量，纯度与完整性三大项。

总量：微量分光光度计测260nm吸收值计算。

纯度：微量分光光度计测260nm/230nm吸收值的比值，用于评估有机溶剂残留；260nm/280nm吸收值的比值，用于评估蛋白质污染比例。

完整性：以Agilent Bioanalyzer进行毛细管电泳(capillary electrophoresis)，并以软件的RIN(RNA Integrity Number)分数评估，10为RNA完整性最好，0为最差。

参考资料来源：百度百科-分光光度计

参考资料来源：百度百科-核糖核酸（RNA)

测RNA浓度 A260必须在1以内?

不是，测RNA浓度A260一般是在10μl的RNA原液取1μl。

提取RNA测浓度时，A260/A280一般对于DNA，纯净的时候比值是1.8，而对于RNA则是接近2.0。如果超过这个值，那么最有可能的就是核酸降解了，因为寡聚的核酸和核苷酸在260的吸收峰比长链核苷酸要大，所以会使比值上升。

A260 / A280比值应大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。较纯净的核酸A260/A230的比值一般在1.8-2.2之间。

RNA浓度测试注意

比值降低往往是样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等。但实际样品情况往往要相对复杂，如《分子克隆实验指南》(第三版)所述，当 0.5％BSA蛋白质污染时，A260和A280的数值都下降，其结果是260/280的比值略微下降。

但同时，蛋白残留会导致A230的数值明显上升，进而显著影响260/230的比值。也就是说，如果样品的260/280比值略低于标准值，但260 /230下降明显，那么就应该考虑污染原因是蛋白残留，而不是胍盐残留。

260/230比值的含义是什么?

A260nm
是核酸最高吸收峰的吸收波长，最佳测量值的范围为0.1至1.0。如果不在此范围，稀释或浓缩样品，使之在此范围内；如果吸光度小于0.05，检查是否存 在操作因素（如移液不准确，样品内有悬浮物等）影响。

DNA样品的A260 吸光度值是否>0.1。（请注意，这个值跟仪器无关，核酸的吸光度必需大于0.1，其值才有效和可靠，因为样品中的杂质和颗粒这些不纯物的干扰通常 会对光有一定吸收，其值<0.1）。

A230nm
是碳水化合物最高吸收峰的吸收波长，比值可进行核酸样品纯度评估：纯DNA和 RNA的A260/A230比值为2.5。若比值小于2.0标明样品被碳水化合物（糖类）、盐类或有机溶剂污染，需要纯化样品。

A230产生负值主要是由 于在很低DNA 浓度的溶液中的一些其他成分的干扰所导致的。在下一个测定中，需要降低样品的稀释度，A230的负值会被校正。

用分光光度计进行核酸定量的注意事项如下

每种核酸的分子构成不一，换算系数不同。定量不同类型的核酸，事先要选择对应的系数。测试前，选择正确的程序，输入原液和稀释液的体积、空白液和样品液。

分光光度计仪器有一定的准确度和精确度。需要考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值，离子浓度等。在测试时，离子浓度太高，也会导致读数漂移，可以稀释样品。

核酸样品存在一些细小的颗粒，为了减少颗粒对测试结果的影响，要求核酸吸光值至少大于0.1A，吸光值最好在0.1~1.5A。

样品不能存在气泡，空白液无悬浮物，否则读数漂移剧烈；必须使用相同的比色杯测试空白液和样品，否则浓度差异太大；不能采用窗口磨损的比色杯；样品的体积必须达到比色杯要求的最小体积等。

以上内容参考百度百科-分光光度计

RNA的OD260/280和OD230/260是什么意思？

OD260/A280和A260/A230是核酸纯度的指示值。

纯度好的DNA或RNA，在pH7-8.5 下OD260 / OD280的比值应该在2.0 或2.5。 纯净的样品比值大于1.8（DNA）或者2.0（RNA）。如果比值低于1.8 或者2.0，表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

OD230表示样品中存在一些污染物，如碳水化合物、盐（胍盐）等，较纯净的核酸A260/A230的比值大于2.0 。

【DNA纯度判断根据】：DNA纯度的判断根据OD260/OD280的比值判断，符合要求纯度高的纯化DNA其OD260/OD280在1.6-1.8之间，低于此范围表明蛋白质含量超标，高于此范围表明样品中含有RNA。

【光密度概念】：OD是optical density（光密度）的缩写， OD＝1og（1／trans），其中trans为检测物的透光值。吸光度（absorbance）是指光线通过溶液或某一物质前的入射光强度与该光线通过溶液或物质后的透射光强度比值的对数，影响它的因素有溶剂、浓度、温度等。

【吸光度概念】：吸光度用A表示，A＝abc，其中a为吸光系数，单位L/(g•cm),b为液层厚度（通常为比色皿的厚度），单位cm ，c为溶液浓度，单位g/L 影响吸光度的因数是b和c。a是与溶质有关的一个常量，温度通过影响c，而影响A。 一般来说OD260代表核酸的吸光度,OD280代表蛋白质的吸光度,OD230代表其他杂质(多糖等)的吸光度。

【备注】：A代表吸光值，而OD是光密度值，A260/A280与OD260/OD280的意思是一样的。