一个DNA分子经过PCR5轮循环则需要引物几个

用pcr技术将外源dna扩增5次，需要每种引物的数量是多少个，为什么？

1.两种引物 2.需要每种7个 你按照这个规律看呢，我做的时候反正是这样子，仅供参考哈！

1个DNA分子进行PCR扩增,循环4次,理论上至少需要几个引物?

如果是双链,第一次循环要1对引物,第二次要2对,第三次4对,第四次要8对.总共15对.上下游引物各15条. 如果是单链,第一次循环要1条引物,第二次要1对,第三次2对,第四次要4对.总共7对半.上下游分别8和7条. 不过这都是理论,实际上引物要多得多才能P出来!

PCR复制n次,至少需要加入多少引物?

10uM浓度的引物，加个1ul足矣。在PCR反应中，经过n次循环，理论上DNA链的数目扩增了2的n次方。PCR的一个循环，一个DNA模板被复制为2个DNA片段。

PCR循环次数通常就是30左右。循环数太多了，虽然在一定程度上能够提高产物量，但是由于反应时间过长。

有一些非特异产物的扩增也会相应增加；而且随着酶的扩增能力下降,合成目标片段的能力也会随之下降,也可能引起其他的非特异性扩增。

扩展资料：

PCR反应五要素：参加PCR反应的物质主要有五种即：引物(PCR引物为DNA片段，细胞内DNA复制的引物为一段RNA链）、酶、dNTP、模板和缓冲液（其中需要Mg2+）。

引物有多种设计方法，由PCR在实验中的目的决定，但基本原则相同。PCR所用的酶主要有两种来源：Taq和Pfu，分别来自两种不同的噬热菌。其中Taq扩增效率高但易发生错配。Pfu扩增效率弱但有纠错功能。所以实际使用时根据需要必须做不同的选择。

模板即扩增用的DNA，可以是任何来源，但有两个原则，第一纯度必须较高，第二浓度不能太高以免抑制。

参考资料来源：百度百科-聚合酶链式反应

利用PCR技术复制那么多DNA一共需要多少引物?每复制一次都需要一段引物吗?

你理解的不错，每次复制都需要消耗一对引物。不过原理还是要好好学哦。 首先引物是论“对”就是两条(rapd等特殊pcr用单条，lamp用6条……算了，那个不是pcr)，这n对引物是完全一样的。不要说“段”，说段会被误会成不一样的序列的~因此你这个题目也可以答成“一个完整的pcr中，n次复制扩增都是同一段引物引导的”。 引物虽然分子的数量很大，但是，那是分子啊~~~反应前加试剂只加几微升就好了。放心~

pcr技术中需要添加的引物有几种

PCR技术的主要步骤如下：

1、dna变性：（90℃-96℃）：在热作用下，双链dna模板的氢键断裂，行程单链dna。
2、退火：（60℃-65℃）：体系温度降低，引物与dna模板结合形成局部双链。

3、延伸：（70℃-75℃：以dntp为原料，在taq酶的作用下（72℃左右），以dntp为底物，从引物的3′端开始，从5′→3′端延伸，用模板法合成互补dna链。

每一个周期都被变性、退火和延长，使dna含量加倍。现在有些pcr即使taq酶活性不是最好的，也能在很短的时间内复制，因为扩增区域很短。

因此，可改为两步法，即在60℃-65℃同时进行退火和延伸，以减少一次升温和降温过程，提高反应速度。

底漆设计基本原则

1、引物长度：15-30bp，一般约20bp。

2、引物碱基：g+c含量为40-60%，g+c太少扩增效果不好，g+c太多易出现非特异性条带。ATGC应随机分配，以避免超过5个嘌呤或嘧啶核苷酸。

3、引物中不应有互补序列。

4、两个引物之间不应有互补序列，特别是要避免3′端的互补重叠。

5、引物与非特异扩增区的同源性不应超过70%。引物3′端的8个碱基不能在待扩增区域外有完整的互补序列，否则容易导致非特异性扩增。

6、底漆3'端的底座，特别是最后两个底座，应严格匹配。最好的选择是G和C。

7、底漆的5'端可以改性。例如，添加限制性酶位点，引入突变位点，用生物素标记，荧光物质，地高辛，添加其他短序列，包括起始密码子、终止密码子等。

扩展资料：

pcr技术的基本原理类似于dna的自然复制过程，其特异性依赖于靶序列两端互补的寡核苷酸引物。

pcr是一种体外dna扩增技术，它依赖于dna聚合酶在模板dna、引物和四种脱氧核苷酸存在下的酶促反应。待扩增的DNA片段及其两侧互补的寡核苷酸链引物通过“高温变性-低温退火-引物延伸”三步反复循环，使DNA片段的数量成倍增加，因此在短时间内，我们需要大量的特异性基因片段。

在环境检测中，靶核酸序列经常存在于细胞提取物等复杂混合物中，且含量非常低。对于检测这种复杂群体中的特定微生物或基因，杂交是不敏感的。

pcr技术可以将目标序列扩增几个数量级，然后用探针杂交检测扩增序列，用于微生物种群结构的定性或定量分析。pcr技术常与rt-pcr、竞争pcr、巢式pcr、rapd、ardra等技术结合使用。

第一代pcr是一种常用的定性pcr技术。采用普通pcr扩增靶基因，琼脂糖凝胶电泳分析产物。第二代pcr为实时pcr（qpcr）。它可以通过在反应体系中加入荧光试剂来实时监测扩增产物的积累，并用荧光曲线的cq值来量化初始目标基因的浓度。

第三代pcr技术，数字pcr（dpcr，digpcr）是一种新的核酸检测和定量方法。它可以通过直接计数目标分子而不依赖于任何校准品或外标物来确定被检测到的目标分子的绝对数量，低至单拷贝。

PCR芯片技术是PCR仪器小型化的发展趋势之一，PCR芯片就是在这一趋势下诞生的。PCR芯片是一种微型PCR仪器，用于在微载体上进行PCR反应。芯片pcr不仅节省了大量试剂，降低了实验成本，而且有助于改进。

参考资料：

百度百科-PCR技术