异丙醇在二正丁胺法滴定异氰酸酯中可用无水乙醇代替吗?
- 教育综合
- 2023-11-10 13:00:03
提取基因组是最后一步用无水乙醇洗涤之后,没有倒掉无水乙醇会有影响吗?
可以用异丙醇代替,两者效果差不多,用异丙醇时体积为1/3~1/2,而用乙醇一般为2倍,但是异丙醇较难挥发,通常先用异丙醇沉淀,然后再用乙醇洗涤.无水乙醇与异丙醇使用无水乙醇与异丙醇会在哪些情况
无水乙醇与异丙醇使用无水乙醇与异丙醇会在哪些情况 氯仿: RNA脱离DNA及蛋白,从混合液中层析到水相.水相中的RNA可用异丙醇沉淀浓缩. 接着用异丙醇进行二次沉淀,随后用乙醇洗涤沉淀,可去除所有残留的蛋白质和无机盐. RNA样品中如果含有无机盐, 有可能对后续实验操作中的一些酶促反应产生抑制作用。实际操作过程中用到的体积不一样,异丙醇一般用0.6-1倍体积,无水乙醇一般用2倍体积。沉淀效果是一样的,如果要提高灵敏度,可以考虑加一些磁珠在DNA的沉淀实验中,为什么要把乙醇预冷
核酸酶在体外适宜的条件也可以降解DNA,因此提核酸要在低温下进行,尽量减少DNA的降解。所以要将乙醇预冷。
用无水乙醇沉淀DNA原因
用无水乙醇沉淀DNA,这是实验中最常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶, 乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。
DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺去DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合,其乙醇的最终含量占67%左右。
因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。
但是加95%的乙醇使总体积增大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。
沉淀DNA时为什么要用无水乙醇
乙醇的优点是可以任意比和水相混溶,乙醇与核酸不会起任何化学反应,对DNA很安全,因此是理想的沉淀剂。 DNA 溶液是DNA以水合状态稳定存在,当加入乙醇时,乙醇会夺DNA周围的水分子,使DNA失水而易于聚合。一般实验中,是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混 合,其乙醇的最终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代懈水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增 大,而DNA在溶液中有一定程度的溶解,因而DNA损失也增大,尤其用多次乙醇沉淀时,就会影响收得率。折中的做法初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙醇,最后的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体为什么异氰酸酯和水的反应在聚氨酯生产中比较重要
异氰酸酯和水的反应是聚氨酯泡沫塑料发泡过程中一个重要的反应,其反应产物聚脲可以在发泡早期提高泡孔壁的强度,为气泡的稳定提供有利的条件,而产物二氧化碳则是泡沫发起过程中重要的气体来源。同时,在异氰酸酯类胶黏剂、湿固化聚氨酯涂料等工业产品的应用中,异氰酸酯和水的反应亦非常重要。本文以高效液相色谱法为主要检测手段,结合核磁氢谱、电喷雾质谱等分析方法,对三种甲苯异氰酸酯、两种甲苯二异氰酸酯和水的反应分别进行了研究,探讨了异氰酸酯和水的反应过程及反应动力学。高效液相色谱法对反应体系的分析结果显示,不论单异氰酸酯还是二元异氰酸酯和水的反应,体系中均存在较高浓度的中间产物胺,且胺的浓度随着反应的进行呈现先增展开全文阅读
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