PA15GFP是穿梭表达载体吗

穿梭载体名词解释

穿梭载体是指含有两个亲缘关系不同的复制子，能在两种不同的生物中复制的。

一、概念：母质粒载体是基因表达载体的一种，既可以在大肠杆菌中、又可以在酵母系统中进行复制与扩增，所以也称为穿梭载体。它分为整合载体和自我复制载体两类。

（1）整合载体：它带有一个酵母URA3标志基因和大肠杆菌的复制和报告基因。

（2）自我复制载体：该类载体在酵母中可以自我复制。

二、特点：

1、酵母质粒载体既可以在大肠杆菌复制与扩增、又可以在酵母系统中复制与扩增，故此类载体又称为穿梭载体（shuttlevector）。

2、在基因工程中，应用上述病毒表达载体在哺乳动物细胞中进行中、小规模的表达是十分实际的。还要有对组织培养技术十分熟悉的前提。但病毒载体的运用仍然存在技术较难、耗时间和不经济的问题．难以大规模地进行表达。

3、介于细菌质粒和动物病毒载体之闻的酵母质粒载体，从技术和经济角度而占，可能更适合当前国内大多数研究室的需要。

三、根据转化细胞中的复制机制，可将酵母质粒载体分为两个基本类型即整合载体和自我复制载体。选择酵母载体的必须慎重考虑以下几个标准：

1、大肠杆菌和酵母均有适当的遗传标志。

2、结合实际需要，考虑在酵母中的复制方式。

3、在酵母和大肠杆菌中的拷贝数

4、要有简单易行的筛选插入物的方式。

请问什么是穿梭质粒载体和表达质粒载体？

穿梭质粒是指可以在多种宿主下复制。比如说通常能够在哺乳动物，酵母或者其他细菌复制表达的质粒，同时可以在大肠杆菌内复制。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。 表达质粒就是指带有启动子，增强子等等，使其在宿主体内不仅仅是可以复制，还能够通过转录翻印，在宿主内表达出相应蛋白的质粒

如何把大肠杆菌中的质粒转入脓杆菌?

首先，你的质粒必须是穿梭质粒，否则不可能转的。 如果是穿梭质粒的话，提取出来直接转化感受态的农杆菌就好。 步骤： 农杆菌感受态细胞的制备 1.挑取少许农杆菌，接种于5ml LB液体培养基 (含50mg/L STR)中，28℃、200r/mim培养过夜。 2.取2ml培养物于LB液体培养基 (含50mg/L STR) 中继续培养，直至OD800 为0.5左右。 3.将培养物置冰浴中30min，4℃、5000r/min、离心5min，弃去上清液。 4.用10ml冷的0.1mol/L NaCl悬浮菌液。 5.4℃、5000r/min，离心5min，弃去上清液。 6.用1ml冷的CaCl2 (20mm

整合载体与穿梭载体有何区别？

整合载体 在生物学研究和基因工程应用中，会涉及将某个基因或某些基因插入到染色体中去的工作，承担这部分工作的载体，可称为整合载体(integration vector)。根据整合方式的不同可分为定点整合和随机整合，按其作用来分可归为目标基因的插入或敲除以及随机突变体库的构建。 1.基因插入 / 基因敲除 同源重组整合载体是最常用的整合载体，该载体一方面含有大肠杆菌克隆载体的骨架，更主要的是含有一段便于同源重组的重组 DNA 片段。也就是从染色体上待插入位点处取出一段 DNA, 将选择标记基因和多克隆位点插入到这个片段中间得到这一重组 DNA 片段。 2.随机插入突变载体 随着功能基因组研究的发展

穿梭载体名词解释

穿梭载体(shuttle vector)是指含有两个亲缘关系不同的复制子，能在两种不同的生物中复制的。 例如既能在原核生物中复制,又能在真核生物中复制的载体。这类载体不仅具有细菌质粒的复制原点及选择标记基因，还有真核生物的自主复制序列(ARS)以及选择标记性状，具有多克隆位点。通常穿梭载体在细菌中用于克隆,扩增克隆的基因，在酵母菌中用于基因表达分析。