用液相色谱测定L-谷氨酸含量 具体要怎么做
- 教育综合
- 2024-07-31 12:59:47
如何用液相色谱仪测氨基酸
反相高效液相色谱法测定烟叶中的游离氨基酸 氨基酸是烟草中的一类重要化学物质,在烟草调制、醇化或发酵、加工直至燃烧过程中,游离氨基酸与还原糖之间可发生酶催化及非酶催化的棕色化反应,生成多种具有蒸煮、烤香、爆米花香味特征的吡喃、吡嗪、吡咯、吡啶类等杂环化合物,某些氨基酸如苯丙氨酸还可自身分解成香味化合物,如苯甲醇、苯乙醇等。氨基酸含量与烟草制品的吃味有着密切的关系,氨基酸在燃烧裂解过程中一般形成具有刺激性的含氮化合物,对烟气香吃味产生不良影响,个别氨基酸还产生HCN等危害健康的烟气成分。一般说来,氨基酸含量太高,烟气辛辣、味苦、刺激性强烈;含量太低时烟气则平淡无味缺少丰满度。因此对氨基酸的分析是一如何正确的进行液相色谱法的含量检测
要得到准确可靠的HPLC定量结果你需要: 1. 有准确可靠的标准品来源和正确的配制过程。 2. 正确样品的前处理比仪器参数的设置更为重要,消除被测组分可能存在的干扰物。 3. 有合适分离度的柱子,确保被测组分可以完全分离。 4. 选择合适的流动相,采用等度洗脱还是梯度洗脱看被测组分间的分离效果。 5. 确保仪器的有良好的稳定性,否则请选择一个合适的内标物校正。液相的稳定性通常还比较好,若液相的稳定很差,表明仪器存在着严重的故障需要立即进行维修。 6. 选择合适的检测器,一般来讲选择性的检测器(如DAD,FLD,VWD)灵敏度高于通用性检测器(如RID),通用性检测器不适合测定痕量水平的组分,对如何建立高效液相色谱法测定含量的方法
1 色谱条件的确定 专属性是色谱条件建立的关键通常是采用 在被测物对照品(或供试品)中加入适量的杂质或辅 料以验证所选色谱条件能否将各杂质与被测物 分离检出 [2] 。应按1(w/w)被测物浓度的各杂质量 添加至被测物中模拟被测物中可能存在杂质的 状态即有少量(约1)杂质存在时能否与被测物 达到完全分离(分离度大于1.5)以验证系统适用 性。只有这样才能较为客观、科学地反映被测物的 实际情况。而不应将被测物与各杂质配制成相同浓 度的溶液因为实际检测中不可能存在这种情况 且该浓度也不易确定。在实际检测时由于被测物 浓度较大很易将相邻杂质峰包含其中。另外还需 测定溶剂和辅料(利用高效液相色谱法测注射液中缬氨酸含量,步骤?
氨基酸类如果是普通的紫外检测器,需要进行衍生进行实验。 柱前衍生,仪器agilent1200,步骤:准备样品与对照品→准备衍生剂(一般是OPA)→应用进样程序进行衍生进样→后边就都一样了。 液相衍生法比较损柱子。展开全文阅读
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