脂类的化学显示法和特异染色法
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- 2024-01-26 07:57:16
什么是细胞化学法,在细胞内脂类的显示中有什么
细胞化学法:是指在不破坏细胞形态结构的状况下,用生化的和物理的技术对各种组分做定量的分析,研究其动态变化,了解细胞代谢过程中各种细胞组分的作用。
在细胞内脂类的显示可以采用自发荧光或吸收荧光素的方法,确定脂类的位置与分布状态。
扩展资料:
蛋白质的显示:
显示蛋白质所用的米氏反应,其中硝基汞试剂作用于细胞中蛋白质侧链上的酪氨酸基,形成红色沉淀,在重氮基反应中氢氧化重氮与酪氨酸、色氨酸和组氨酸基反应形成有颜色的复合物。
某些碳水化合物、酯类和DNA可用对其醛基有特异结合的试剂,如雪夫氏试剂。对核酸的染色方法与核苷酸磷酸、碳水化合物和嘌呤及嘧啶的三种成分的特性有关。
参考资料来源:百度百科-细胞化学
请叙述细胞化学法在细胞内脂类的显示实验中的应用?
1. 金属沉淀法:利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀,借以辨认所检查的 物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后,反应产物最终生成CoS 或PbS 有色沉淀,而显示出酶活性。 2. 偶氮偶联法:酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。 3. Schiff 反应:细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无色品红变为红色。这种反应通 常用于显示糖和脱氧核糖核酸(Feulgen 反应)。 4. 联苯胺反应:过氧化氢酶分解H202。产生新生氧,后者再将无色的联苯胺氧化 成联苯胺蓝,进而变成棕色化合物。 5. 普鲁士蓝反应:三价铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成普鲁士蓝。 6. Formazane 反应:怎么检测生物组织中的油脂
脂肪和类脂(磷脂、糖脂、固醇脂等)统称为脂类。它是构成人体组织的正常成分,不溶于水而易溶于酒精、乙醚、氯仿等脂溶剂中。在化学组成上,脂类属于脂肪酸的酯或与这些酯有关的物质。脂类的主要功能是氧化供能。 脂肪主要存积于脂肪组织中,并以油滴状的微粒存在脂肪细胞浆内。 在病理检验中,脂类染色法最常用以证明脂肪变性,脂肪栓子以及肿瘤的鉴别。脂类染色使用最广泛的染料是苏丹染料,最常用的有苏丹Ⅲ,苏丹Ⅳ,苏丹黑及油红O等。脂肪被染色,实际上是苏丹染料被脂肪溶解吸附而呈现染料的颜色。经研究认为组织中脂质在液态或半液态时,对苏丹染料着色效果最好。根据这一原理,适当提高温度(37℃-60℃)对组织切片染色效果是有高倍显微镜观察脂肪的染色方法?急!!!
答:1、实验原理:脂肪可能被苏丹Ⅲ染液染成橘黄(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。 2、实验材料:选择花生或含油脂多的作实验材料。 3、实验过程:①取材:取一粒浸泡过的花生种子,去掉种皮。②切片:用刀片在花生子叶的横断面上切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用。③制片:从培养皿中选取最薄切片,用毛笔蘸取放在载玻上中央。④染色:在花生子叶薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液,染色3分钟。用吸水纸吸取染液,再用50%的酒精洗去浮色。盖上盖玻片。⑤观察:先用低倍,再转到高倍镜观察。常用的细胞染色方法有哪些
常用的细胞染色方法有:
1、简单染色法,常用碱性染料如美蓝等进行简单染色;
2、革兰氏染色法,主要包括结晶紫初染、碘液媒染、乙醇(或丙酮)脱色以及番红复染四个过程;
3、瑞氏染色法,瑞氏染料溶剂主要是由伊红美蓝组成;
4、吉姆萨染色法,吉姆萨染色原理与结果和瑞特染色法基本相同;
5、细胞免疫荧光染色法,免疫荧光染色的主要原理是利用抗原抗体之间的特异性结合。
染色是生物显微玻片标本制作中最重要的环节之一。先把破坏细胞膜的选择透过性,再使用染色剂,将生物组织浸入染色剂内,使组织细胞的某一部分染上与其他部分不同的颜色或深度不同的颜色,产生不同的折射率,以便观察。
另外,银染法也较常用。当组织块浸入硝酸银溶液中时,有的组织结构能直接把硝酸银还原,使银粒附于其上,呈棕黑色或棕黄色。有些结构本身对硝酸银无直接还原能力,若加入还原剂,可使硝酸银还原沉淀显色。
扩展资料:
染色细胞固定有物理法与化学法,物理法为干燥和火焰固定,化学法最常用的是甲醛、乙醇、丙酮和醋酸等。
1、偶氮偶联法:利用人工合成的酶底物,在酶作用下,产生分解产物,再与重氮盐结合引起偶氮偶联,使其形成不溶性的偶氮色素,以此证明酶的存在。
2、联苯胺法:粒细胞和单核细胞中的过氧化物酶作用于过氧化氢,释放新生态氧,使无色的联苯胺形成蓝色沉淀。
3、普鲁士蓝法:细胞内、外铁与酸性亚铁氰化钾作用,形成蓝色亚铁氰化铁沉淀。
4、雪夫反应:过碘酸氧化细胞内糖类中乙二醇基形成乙醛基,醛基与雪夫试剂作用,使无色品红形成红色沉淀。
5、金属沉着法:其他尚有物理学方法,如脂溶性染料染色(显示脂质)、荧光显示、放射自显影以及体外活体染色亦常用于临床血液细胞学诊断。
参考资料:百度百科——瑞氏染色法
参考资料:百度百科——革兰氏染色法
参考资料:百度百科——吉姆萨染色
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