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核酸点样仪需要放在生物安全柜里吗

新冠核酸检测标本处理哪些不符合安全管理规定

检测人员基本要求

实验室检测技术人员应具备相关专业的大专以上学历或具有中级及以上专业技术职务任职资格,并有2年以上的实验室工作经历和基因检验相关培训合格证书。实验室配备的工作人员应与所开展检测项目及标本量相适宜,以保证及时、熟练地进行实验和报告结果,保证结果的准确性。

二、标本安全管理

标本转运箱封闭前,须使用75%酒精或0.2%含氯消毒剂喷洒消毒。

标本包装应符合国际民航组织文件Doc9284《危险品航空安全运输技术细则》的PI602分类包装要求。涉及外部标本运输的,应按照A类感染性物质进行三层包装。疑似或确诊患者标本应标示有特殊标识,并进行单独转运。检测完成后标本,若检测结果为阴性,剩余标本及核酸可在结果报告发出24小时后装入专用密封废物转运袋中进行压力蒸汽灭菌处理,随后随其他医疗废物一起转运出实验室进行销毁处理;若检测结果为阳性,剩余标本应进行复核检测。

三、实验室检测安全管理

1.基本要求

标本灭活及检测应在生物安全二级实验室进行,同时采用生物安全三级实验室的个人防护。开展新冠病毒核酸检测的实验室应制定实验室生物安全相关程序文件及实验室生物安全操作失误或意外的处理操作程序,并建立实验室环境消毒处理记录。

2.实验前安全要求

应使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行桌面、台面及地面消毒。消毒液需每天新鲜配制,不超过24小时。转运至实验室的标本转运桶应在生物安全柜内开启。转运桶开启后,使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精对转运桶内壁和标本采集密封袋进行喷洒消毒。取出标本采集管后应首先检查标本管外壁是否有破损、管口是否泄露或有管壁残留物。确认无渗漏后,推荐用0.2%含氯消毒剂喷洒、擦拭消毒样品管外表面(此处不建议使用75%酒精,以免破坏样品标识)。如发现渗漏应立即用吸水纸覆盖,并喷洒有效氯含量为0.55%的含氯消毒剂进行消毒处理,不得对标本继续检测操作,做好标本不合格记录后需立即进行密封打包,压力蒸汽灭菌处理后销毁。

实验室操作人员在进行标本热灭活时,温浴前需旋紧标本采集管管盖,必要时可用封口膜密闭管盖;温浴过程中可每隔10分钟将标本轻柔摇匀1次,以保证标本均匀灭活;温浴后标本需静置至室温或至少1.Omin使气溶胶沉降,随后再开盖进行后续核酸提取。

3.核酸提取和检测安全要求

标本进行核酸提取和检测时应尽可能在生物安全柜内进行操作。如为打开标本管盖或其他有可能产生气溶胶的操作,则必须在生物安全柜内进行。

4.实验结束后安全要求

需对实验室环境进行清洁消毒。

(1)实验室空气消毒。实验室每次检测完毕后应进行房间紫外消毒30分钟或紫外消毒机照射消毒1小时。必要时可采用核酸清除剂等试剂清除实验室残留核酸。

(2)工作台面消毒。每天实验后,使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行台面、地面消毒。

(3)生物安全柜消毒。实验使用后的耗材废弃物放入医疗废物垃圾袋中,包扎后使用0.2%含有效氯消毒液或75%酒精喷洒消毒其外表面。手消毒后将垃圾袋带出生物安全柜放入实验室废弃物转运袋中。试管架、实验台面、移液器等使用75%酒精进行擦拭。随后关闭生物安全柜,紫外灯消毒30分钟。

(4)转运容器消毒。转运及存放标本的容器使用前后需使用0.2%含氯消毒剂或75%酒精进行擦拭或喷洒消毒。

(5)塑料或有机玻璃材质物品消毒:使用0.2%含氯消毒剂或过氧乙酸或过氧化氢擦拭或喷洒消毒。

四、实验室医疗废物管理

1.基本要求

开展新冠病毒核酸检测的实验室应制定医疗废物处置程序及污物、污水处理操作程序。所有的危险性医疗废物必须按照统一规格化的容器和标示方式,完整且合规地标示废物内容。应由经过适当培训的人员使用适当的个人防护装备和设备处理危险性医疗废物。实验室应建立医疗废物处理记录,定期对实验室排风HEPA过滤器进行捡漏和更换,定期对处理后的污水进行监测,采用生物指示剂监测压力灭菌效果。

2.医疗废物的处理措施

医疗废物的处理是控制实验室安全的关键环节,必须充分掌握生物安全废弃物的分类,并严格执行相应的处理程序。

(1)废液的处理

实验室产生的废液可分为普通污水和感染性废液。普通污水产生于洗手池等设备,对此类污水应排入实验室水处理系统,经统一处理达标后进行排放。感染性废液即在实验操作过程中产生的废液,需采用化学消毒(0.55%含氯消毒剂处理)或物理消毒(紫外照射30分钟以上)方式处理,确认彻底消毒灭活后方可排入实验室水处理系统,经统一处理达标后进行排放。污水消毒处理效果按GB18466《医疗机构水污染物排放标准》相关规定进行评价。

(2)固体废物的处理

实验室固体废物应分类收集。固体废物的收集容器应具有不易破裂、防渗漏、耐湿耐热、可密封等特性。实验室内的潜在感染性废物不允许堆积存放,应及时进行压力蒸汽灭菌处理。废物处置之前,应存放在实验室内指定的安全位置。小型固体废物如检测耗材、个人防护装备等均需使用双层防渗漏专用包装袋打包密封后经过压力蒸汽灭菌处理,再沿医疗废物通道转运出实验室。

体积较大的固体废物如HEPA过滤器,应由专业人士进行原位消毒后,装入安全容器内进行消毒灭菌。不能进行压力蒸汽灭菌的物品如电子设备可采用环氧乙烷熏蒸消毒处理。经消毒灭菌处理后移出实验室的固体废物需集中交由医疗废物处理单位进行处置。

五、实验室污染的处理

1.标本污染生物安全柜的操作台造成局限污染时:立即用吸水纸覆盖,并使用0.55%含氯消毒剂进行喷洒消毒。消毒液需要现用现配,24小时内使用。

2.标本倾覆造成实验室污染时:保持实验室空间密闭,避免污染物扩散。立即使用润湿有0.55%含氯消毒剂的毛巾覆盖污染区。必要时(如大量溢撒时)可用过氧乙酸加热熏蒸实验室,剂量为2g/m3,熏蒸过夜;或20g/L过氧乙酸消毒液用气溶胶喷雾器喷雾,用量8m1./m3,作用1-2小时;必要时或用高镒酸钾-甲醛熏蒸:高镒酸钾8g/m3,放入耐热耐腐蚀容器(陶罐或玻璃容器),后加入甲醛(40%)10m1./m3,熏蒸4小时以上。熏蒸时室内湿度60%-80虬

3.清理污染物时严格遵循活病毒生物安全操作要求,采用压力蒸汽灭菌处理,并进行实验室换气等,防止次生危害。

六、检测结果反馈要求

1.报告时限

对于发热门诊、急诊患者,在6小时内报告核酸检测结果;对于普通门诊、住院患者及陪护人员等人群,原则上在12小时内报告结果;对于“愿检尽检”人群,一般在24小时内报告结果。医疗机构应为受检者出具检测报告,并告知其查询方式,不得以任何理由不出具检测报告。

2.检测报告

应按照《新型冠状病毒核酸检测报告单》的参考样式出具检测报告,在卫生健康行政部门规定下,互认检测结果。医疗机构可采用纸质、快递、网络或信息化系统等多种形式,发放核酸检测报告,并注意保护个人隐私。发现核酸检测阳性结果时应按相关要求在12小时内进行传染病上报及后续流行病学调查工作。

提取出的核酸可以在生物安全柜柜外面加嘛

提取出的核酸不可以在生物安全柜柜外面加。提取出的核酸在生物安全柜柜外面加是一种严重的违纪行为,这种东西是不可以随意提取的,必须在专用的设备中中提取。生物安全柜是为操作原代培养物,菌毒株以及诊断性标本等具有感染性的实验材料时,用来保护操作者本人,实验室环境以及实验材料,使其避免暴露于上述操作过程中可能产生的感染性气溶胶和溅出物而设计的。

核酸实验室设计有什么要求?

一、PCR实验室设计规范SICOLAB PCR(聚合酶链式反应)实验室又叫基因扩增实验室 《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》(卫医发[2002]10号) 《临床基因扩增检验实验室工作规范》(卫检字[2002]8号) 二、核酸实验室设计基本要求SICOLAB 1、试剂准备区:是PCR实验室中最为“洁净”的区域,它不应有任何核酸成分的存在,否则将严重影响检测结果的准确性。标本的制备应在生物安全柜内进行。 主要设备:冰箱、低温冰箱、混匀器、微量加样器(0.2-1000ul)、移动紫外灯。 2、样本准备区:核酸提取、贮存,扩增反应管制作。 主要设备:冰箱、超低温冰箱、高速冷冻离心机、混匀器、微量加

HIV核酸检测的HIV核酸检测实验室要求

HIV核酸检测应在合适的实验室中进行,应建立与实验和实验室管理相关的标准操作指导书和制定严格的管理制度,工作人员必须充分了解各项规定并严格遵照执行。 实验室应设置两个独立的工作区域:核酸扩增前区和核酸扩增后区。核酸扩增前区包
括试剂准备区和样品处理区,设在不同房间或区域;核酸扩增后区包括扩增区和扩增产物分析区,设在不同的房间或区域。各区的功能是:
1.1 试剂准备区:扩增试剂的储备、配制和分装。
1.2 样品处理区:样品登记、处理和分装;核酸提取、保存和使用,PCR扩增的第一轮加样。
1.3 扩增区:核酸扩增。如果在此区进行套式PCR的第二轮加样,应在PCR防护罩内进行。
1.4 扩增产物分析区:扩增产物的电泳、杂交、成像、序列测定、结果分析、登记及报告。
在满足下列要求的前提下,核酸扩增前区或核酸扩增后区可设在一个房间内:
1.4.1 核酸扩增前区实验室内设置两个不同位置的实验区,试剂配置在超净工作台中操作,样品处理在生物安全柜内操作。
1.4.2 在核酸扩增后区使用全封闭的扩增和检测系统时,如实时荧光PCR仪等。
1.4.3 每个实验人员使用各自的试剂、耗材、移液器和盛放污染物的盛器。
1.4.4 在实验前后对操作区域和共享器具进行清洁及消毒。
1.4.5 各区域的试剂、器具、仪器和设备为该区专用,不得交叉使用。 3.1 根据检测项目配备相应的设施和设备。
3.2 各区域的设施和设备为专用,应根据实验要求在相应区域配置。
3.3 试剂准备区:配置冰箱、超净工作台、普通离心机、加样器、振荡器、废弃物容器、可移动紫外灯。
3.4 样品处理区:配置-80℃冰箱、生物安全柜、高速制冷离心机、加样器、振荡器、制冰器或制冷模块、恒温水浴或干浴、上下水设备、废弃物容器、紫外灯。
3.5 扩增区:配置核酸扩增仪、普通冰箱、无层流PCR操作柜或超净工作台、微型离心机、加样器、废弃物容器、紫外灯。
3.6 扩增产物分析区:配置电泳仪、电泳槽、加样器、紫外透射仪、摄影/像设备、普通冰箱、普通离心机、恒温水浴、微波炉、上下水设备、废弃物容器、紫外灯等。测序仪可安置在其他专门实验区。
3.7 各区域应使用专用或一次性工作服、帽子、口罩鞋套及袖套,配备防紫外线眼镜。 必须符合艾滋病实验室的通用生物安全要求。5 .防止核酸残余污染措施 5.1 严格执行实验室分区制度,防止实验室核酸残余(Carry-over)污染措施
5.2 各区域只用于特定的操作,不得从事其它工作。
5.3 仪器和材料的专用制度
仪器、设备、材料、设施均应按工作区域进行标识,不得交叉混用。
5.4 单向工作流向制度
5.4.1 实验室的气流应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。建议扩增前区保持弱正压状态,扩增后区保持弱负压状态。
5.4.2 实验人员单向工作流向应该为:试剂准备区→样品处理区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流动。原则上实验人员在扩增后区工作后当天不能再返回扩增前区工作。
5.4.3 实验用品单向工作流向应该为:试剂准备区→样品处理区→扩增区→扩增产物分析区,不得逆向流动。实验用品包括实验材料(试剂、样品和扩增产物)、实验器材(容器、板架、实验服、帽子、口罩、手套、鞋套)、办公用品(记录纸、笔等)、以及清洁材料等。
5.5 实验室防止核酸残余污染的处理程序
5.5.1 实验前将70%乙醇或0.1~1%次氯酸钠溶液或涂布于操作台或器具表面,两分钟后用纸巾擦净。
5.5.2 实验前移入所需的试剂、耗材、样品以及盛放污染物的盛器。
5.5.3 用于定性与定量核酸检测的所有试剂、耗材、移液器等必须分开使用。实验结束后取出个人专用物品至存放区;封闭污染物盛器并置入污物袋;取出共用器具至存放区;将70%乙醇或0.1~1%次氯酸钠溶液涂布于操作台或器具表面,两分钟后用纸巾擦净;打开紫外灯照射至少1小时。
5.5.4 定期(每周)对实验室进行全面清洁,房间内所有工作台面、地面以及仪器设备表面用70%乙醇或0.1~1%次氯酸钠清洁,用紫外灯进行台面和空气消毒。定期(每月)对移液器进行清洁。
5.5.5 定期(每月)监测和报告实验室核酸残余污染情况,监测部位包括核酸检测前后区域各实验室以及共用走廊等。
5.5.6 每次试验后,将同批试验样品的DNA序列以及与上一批试验样品的DNA序列一起进行遗传进化树污染分析。 6.1 所有废弃物应按照HIV污染物品处理。
6.2 化学物品如溴乙啶处理的琼脂糖凝胶应该按有关方案处理。

核酸pcr步骤

一、个人三级防护穿戴 带一次性帽子、佩戴医用N95、一次性防护服、一次性鞋套、一次性防水靴套、一层乳胶手套、外层一次性隔离衣、防护目镜、第二层乳胶手套、穿戴完毕后应尽快通过专用缓冲间或者走廊,进入核酸提取区(专业核酸提取实验室)。  二、样本灭活处理 核酸检测须有两名工作人员快速通过进入实验室,进行灭活实验操作。生物安全柜内需配备吸水棉与消毒酒精、有条件可配备吸水台布,对样本溢洒时进行紧急处理;打开二级容器,用75%酒精消毒物体表面,检测样本管密闭性后进行灭活处理,灭活条件(56℃,30min,恒温样本灭菌仪等多种方式),取出酒精灭活管用酒精擦拭外表,将样本放入到生物安全柜内。 三、手工核酸
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