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芦丁对照品溶液的制备

分光光度中采用标准曲线法测定过程及数据处理的方法分别是什么?

仪器与试剂


1.仪器紫外-可见分光光度计;量瓶、移液管、吸量管。

2.试剂亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,乙醇(均为分析纯),5%亚硝酸钠溶液,10%硝酸铝溶液,1mol/L氢氧化钠溶液,30%乙醇溶液,芦丁对照品,芦丁(原料药)。


实验内容与步骤


1.对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1mL中含无水芦丁0.1mg)。

2.标准曲线的制备精密量取对照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分别置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。各精密加入10%硝酸铝溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。各加1lmol/L氢氧化钠溶液4.0mL,用蒸馏水稀释至刻度,充分摇匀,放置15分钟,用分光光度计,在510nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

3.试样测定精密量取芦丁试样溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按标准曲线制备项下自“各加30%乙醇使成5.0ml。“起依法操作直至测定出样品的吸光度。


数据处理


1.根据测得的对照品的数据,绘制A—C标准曲线或计算回归方程。

2.根据测得的试样的数据,从标准曲线上读出或由回归方程计算出试样溶液中芦丁的重量(rag),按下式计算:

槐花科普知识

槐花:又名洋槐花,广义的洋槐花指豆科植物的花及花蕾,一般将开放的花朵称为“槐花”,也称“槐蕊”,花蕾则称为“槐米”。

1、常植于屋边、路边,中国各地普遍栽培,主要在北方,以黄土高原和华北平原为多,一般在每年4,5月开花,花期一般为10-15天左右。

2、洋槐花具有良好的观赏价值,每到花期来临时,一串串洁白的槐花缀满树枝,空气中弥漫着淡淡的素雅的清香,沁人心脾。



扩展资料:

选地整地:

1、槐树(洋槐)选择向阳、肥沃、疏松、排水良好的壤土。深翻60厘米,整平耙细,作畦,畦宽70厘米,施足底肥,每亩用腐熟有机肥500千克或尿素5千克,圈肥3000-4000千克撒于畦面。

播种分株,可采用播种繁殖,也可用根蘖进行分株繁殖:

1、种子处理 选成熟、饱满的种子先用70-80℃温水浸种24小时,捞出掺2-3倍细沙,拌匀,堆放室内,催芽时注意经常翻倒调节上下温度一致,以使发芽整齐,一般需7-10天,待种子裂口25%-30%时即可播种。

2、育苗 于春、秋季条播或穴播,条播法按播幅10-15厘米,覆土2-3厘米,播后镇压,每亩种量10-15千克;穴播法按穴距10-15厘米播种,每亩用种量4-5千克。

3、假植移栽 在北方,秋末落叶后,土壤冻结前起苗,假植越冬,挖假植沟,沟宽1-1.2米,深60-70厘米,翌春按株行距60厘米×40厘米栽植,栽后浇水。根蘖繁殖时,可挖取成龄树的根蘖苗,按株行距1.8米×1.3米开穴,每穴1株,一般4-5年可成株。

参考资料:百度百科-槐花

如何用标准曲线法测定物质含量

以芦丁为例,其他物质测定方式雷同


仪器与试剂


1.仪器紫外-可见分光光度计;量瓶、移液管、吸量管。

2.试剂亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,乙醇(均为分析纯),5%亚硝酸钠溶液,10%硝酸铝溶液,1mol/L氢氧化钠溶液,30%乙醇溶液,芦丁对照品,芦丁(原料药)。


实验内容与步骤


1.对照品溶液的制备精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品100mg,置100mL量瓶中,加甲醇70mL,置水浴上微热使溶解,放冷,加甲醇至刻度,摇匀。精密吸取10mL,置100mL量瓶中,加水至刻度,摇匀,即得(每1mL中含无水芦丁0.1mg)。

2.标准曲线的制备精密量取对照品溶液(o.1mg/ml)o.0mL、1.0mL、2.0mL、3.0mL、4.0mL、5.0mL,分别置于10mL量瓶中,各加30%乙醇使成5.0mL,各精密加入5%亚硝酸钠溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。各精密加入10%硝酸铝溶液0.3mL,充分摇匀,放置6分钟。各加1lmol/L氢氧化钠溶液4.0mL,用蒸馏水稀释至刻度,充分摇匀,放置15分钟,用分光光度计,在510nm波长处测定吸光度。以吸光度为纵坐标,浓度为横坐标,绘制标准曲线。

3.试样测定精密量取芦丁试样溶液(0.1mg/ml)3.0mL,置10mL量瓶中,按标准曲线制备项下自“各加30%乙醇使成5.0ml。“起依法操作直至测定出样品的吸光度。


数据处理


1.根据测得的对照品的数据,绘制A—C标准曲线或计算回归方程。

2.根据测得的试样的数据,从标准曲线上读出或由回归方程计算出试样溶液中芦丁的重量(rag),按下式计算:

为什么要以芦丁作为黄酮类测定的参比溶液

对照品溶液的制备精密称定甘草苷、柚皮苷、芦丁标准品适量,用甲醇溶解,分别定容于25,10,10 ml容量瓶中,制得浓度为0.075 04 g·L-1的甘草苷对照品溶液、0.968 g·L-1的柚皮苷对照品溶液和1.003 g·L-1的芦丁对照品溶液。 2.2 样品的提取取甘草粉末适量,精密称定,加甲醇50 ml,称重, (250 W,20 kHz)超声提取80 min,称重,补足损失重量,过滤,收集续滤液,即得。 2.3 测定方法 2.3.1 甘草苷为对照品的测定方法精确吸取提取液0.5 ml,加入1 ml甲醇,其中一份加入10%KOH溶液0.5 ml显色,室温放置5 min,用甲醇稀释至10

以芦丁标准品做标准曲线为什么要用亚硝酸钠溶液,硝酸铝溶液,氢氧化钠溶液

这些构成显色剂,按顺序依次加入5%亚硝酸钠溶液,10%硝酸铝溶液,5%氢氧化钠溶液可以使芦丁显色(橙红色)。通常用于总黄酮的含量测定,其原理是:黄酮中的处于相邻羰基、羟基可以共同络合金属而显色。根据显色之深浅(即吸光度A值之大小),判断的总黄酮含量之高低。常用的显色剂是亚硝酸钠-硝酸铝,检测波长是508nm。步骤: 样品液 0.5mL(具体的用量视样品液的浓度而定)→加5%亚硝酸钠溶液0.15mL 静置6min→加10%硝酸铝溶液0.15mL 静置6min→加4%氢氧化钠溶液2mL →加蒸馏水2.2mL(蒸馏水用于稀释和调总体积,要使待测混合液的总体称为5mL,2.2mL是暂定的)→待测混合液
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